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PCR em Tempo Real: do ZERO à Expressão Gênica

Antes mesmo do “boom” que tornou a técnica amplamente divulgada e conhecida durante a pandemia do SARS-COV-2 por se tornar técnica padrão ouro para o diagnóstica da doença, a PCR em Tempo Real (qPCR) já era uma técnica muito usada para a quantificação da expressão gênica em pesquisas e análises de laboratório. Esta técnica, é comumente utilizada em diversas áreas como a de diagnóstico molecular, biologia forense, segurança alimentar, entre muitas outras. 

O presente curso, tem um enfoque em mostrar para pessoas de diferentes graus de experiência toda a técnica e entendimento a respeito da qPCR, visto que isso pode se tornar um diferencial tanto para sua pesquisa quanto para o mercado de trabalho.


Para quem é o curso?

  • Estudantes de todos os níveis (graduação e pós-graduação);
  • Profissionais da área da saúde;
  • Interessados em dominar a área da saúde.

 

Detalhamento de conteúdo:

Módulo 1:  Introdutório - nivelando os conhecimentos

Neste módulo serão abordados tópicos importantes para o entendimento do curso. Aqui você saberá o que é PCR/qPCR e suas aplicações, conceitos de Biologia Molecular, Dogma central da Biologia molecular (Replicação, Transcrição e Tradução), Técnicas de Biologia Molecular e os princípios da PCR em tempo real. 

 

Módulo 2:  Mão na massa - Preparando um experimento de PCR em tempo real

Neste módulo que é mais prático, você aprenderá sobre as técnicas e peculiaridades do experimento de PCR em tempo real. Serão abordados os tópicos referentes ao fluxo de trabalho e desenho experimental do experimento, extração de RNA, QC da amostra - quantificação e integridade, síntese de cDNA, desenho e validação de primers, genes de Referência na quantificação relativa e planejamento de um ensaio de qPCR e preparo de uma placa.

 

Módulo 3: Análise de Resultados e Solução de Problemas

Este módulo aborda as adversidades que podem ocorrer durante o experimento e suas soluções, além de falar sobre métodos de análise da expressão gênica, análise de eficiência dos primers, e como apresentar os dados em publicações científicas. 


 

NIVELANDO OS CONHECIMENTOS

1
Conceitos iniciais: princípios históricos e teóricos da PCR
2
Princípios Básicos de Biologia Molecular
3
Dogma Central da Biologia Molecular
4
Introdução à PCR em Tempo Real

MÃO NA MASSA: PREPARANDO UM EXPERIMENTO DE qPCR

5
Fluxo de trabalho e planejamento de Design Experimental
6
Desenho de Primers
7
Extração de RNA
8
Análise de qualidade da amostra(QC)
9
Síntese de cDNA
10
Montagem de uma placa de qPCR - do desenho experimental à pipetagem
11
Genes de referência na quantificação relativa

ANÁLISE DE RESULTADOS,PUBLICAÇÃO DOS RESULTADOS E SOLUÇÃO DE PROBLEMAS

12
Analisando os resultados: a escolha do melhor método.
13
A eficiência dos primers na análise de expressão gênica.
14
MIQE: Diretrizes para divulgação de resultados de qPCR em periódicos científicos.
15
Problemas frequentes e soluções

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